方法介紹

基本原理

富爾根氏核染色法是根據(jù)席夫氏（Schiff）試劑進(jìn)行的反應(yīng)而建立的。席夫氏試劑含有堿性復(fù)紅和亞硫酸，堿性復(fù)紅與亞硫酸結(jié)合后，失去醌式結(jié)構(gòu)而變?yōu)闊o色，當(dāng)DNA經(jīng)酸作用后生成的醛化合物與席夫氏試劑結(jié)合后，使醌式結(jié)構(gòu)恢復(fù)，合成一種帶紫紅色的堿性復(fù)紅衍生物。這個(gè)染色法對(duì)DNA具有特異性。細(xì)菌細(xì)胞用此法染色后，可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到核。

操作步驟

1．取培養(yǎng)8—10小時(shí)的釀酒酵母涂片，室溫下風(fēng)干。

2．將涂片置于有2％鋨酸的蒸汽瓶口上，用鋨酸蒸氣固定5分鐘，然后放入加熱至60℃的Schandiun固定液中10分鐘。

3．用水沖洗固定后的標(biāo)本，然后放在60℃1mol/LHCl中水解8分鐘，水洗。

4．用席夫氏試劑作用30—40分鐘。

5．由席夫氏試劑中取出放在亞硫酸水溶液中洗5分鐘。

6．由亞硫酸水溶液中取出水洗，干燥后，用油鏡觀察。