平酸菌是引起罐頭食品酸敗變質(zhì)而又不胖聽(即產(chǎn)酸不產(chǎn)氣)的微生物在罐頭工業(yè)上稱為平酸菌。它是兼性厭氧芽孢桿菌。

其他信息

分類信息

嗜熱脂肪牙孢桿菌:(Bacillus stearothermo philus)

引起“平酸”現(xiàn)象的細(xì)菌為嗜熱性酸敗菌。引起低酸性罐頭酸敗,是嗜熱脂肪芽孢桿菌;引起牛奶和番茄制品罐頭酸敗的是凝結(jié)芽孢桿菌,是罐頭工業(yè)至今發(fā)現(xiàn)最耐高溫的芽孢桿菌。嗜熱脂肪芽孢桿菌D121.1℃ =4~5分鐘,而作為制訂殺菌規(guī)程對(duì)象菌的肉毒梭狀芽孢桿菌D121.1℃ =0.1~0.25分鐘,可見嗜熱脂肪芽孢桿菌的耐熱性比肉毒梭狀芽孢桿菌還要強(qiáng)得多。

革蘭氏陽(yáng)性菌,能運(yùn)動(dòng),周生鞭毛。芽胞橢圓形,亞端生或端生,通常使孢囊膨大,最高生長(zhǎng)溫度65-75℃。能夠葡萄糖產(chǎn)酸,水解淀粉。

凝結(jié)芽孢桿菌:(Bacillus Coagulans)

革蘭氏陽(yáng)性,能運(yùn)動(dòng),周生鞭毛。芽孢椰圓形或柱狀,一次端生或端生,偶爾中生,有些菌株孢囊膨大不明顯,有些菌株的孢囊大。最高生長(zhǎng)溫度55-60℃,最低生長(zhǎng)溫度15-25℃。接觸酶陽(yáng)性,葡萄糖產(chǎn)酸。

檢驗(yàn)方法

1.試樣制備

罐頭樣品預(yù)先經(jīng)55℃保溫一周,然后按正常方法進(jìn)行開罐,吸取內(nèi)容物液體1毫升,如為固體內(nèi)容物則取1克,以無(wú)菌手續(xù)接種于3#培養(yǎng)基中,每罐接種2支。

2.增菌培養(yǎng)

接種試樣的3#培養(yǎng)基試管,于55℃培養(yǎng)48小時(shí),如發(fā)現(xiàn)指示劑由紫變黃即判斷為陽(yáng)性,同時(shí)進(jìn)行涂片鏡檢為芽孢桿菌(有時(shí)不易檢到芽胞),如陽(yáng)性需繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)。

3.純分離培養(yǎng)

將陽(yáng)性培養(yǎng)基試管劃線接種于3#培養(yǎng)基瓊脂平板55℃培養(yǎng)48小時(shí),檢查有無(wú)可疑菌落(菌落黃色,周圍有黃色環(huán),中心色深不透明),如有可疑菌落則接種于普通瓊脂斜面和芽胞培養(yǎng)基斜面,55℃培養(yǎng)24小時(shí),涂片鏡檢觀察有無(wú)芽胞,以及芽胞的形狀及位置,并同時(shí)以普通瓊脂斜面培養(yǎng)物進(jìn)行生化學(xué)試驗(yàn)。

4.鑒別

菌體形態(tài):為革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌。

生化反應(yīng):取上項(xiàng)斜面培養(yǎng)物按下列項(xiàng)目進(jìn)行鑒別。

平酸菌生化反應(yīng)鑒別表

項(xiàng)目菌別60℃培養(yǎng)硝酸鹽葡萄糖靛基質(zhì)V-P反應(yīng)7%NaCL肉湯檸檬酸鹽酸性胰胨
嗜熱脂肪芽孢桿菌生長(zhǎng)d ++不生長(zhǎng)
凝結(jié)芽孢桿菌不定d-+b生長(zhǎng)

注:+為產(chǎn)酸或陽(yáng)性,-為陰性d+:50-85%的陽(yáng)性d-:15--49%的陽(yáng)性b:25-49%陽(yáng)性 45-55℃培養(yǎng)三天后無(wú)反應(yīng)報(bào)告為陰性。

5.培養(yǎng)基的配方

①3#葡萄糖肉湯培養(yǎng):蛋白胨 5克 葡萄糖 5克  酵母浸膏 1克 牛肉膏 5克  可溶性淀粉 1克 黃豆浸出液 50mL  水1000mL 0.4%溴甲酚紫 4mL  pH 7.0-7.2  115℃高壓滅菌15min

②3#培養(yǎng)基瓊脂: 3#葡萄糖肉湯 1000mL 瓊脂 18-20克 pH 7.2-7.4  121℃高壓滅菌15min

③酸性胰胨瓊脂 胰蛋白胨 5克 酵母膏 5克 葡萄糖 5克 K2HPO4 4克 水1000mL 瓊脂 18-22克(15-20g) 瓊脂粉 12克 pH5.0  121℃高壓滅菌15 min

④7%NaCL肉湯 蛋白胨 5克 牛肉膏 3克 NaCL 70克 水 1000mL pH7.0 121℃高壓滅菌15min

⑤芽胞培養(yǎng)基 牛肉膏 10克 蛋白胨 10克 NaCL 5克 K2HPO4 3克 (K2HPO4 3H2O 3.9克) MnSO4 0.03克 瓊脂 25克 pH 7.2 121℃高壓滅菌15min

⑥V-P培養(yǎng)基 蛋白胨 5克 葡萄糖 5克 K2HPO4 5克 蒸餾水 1000mL pH7.2 121℃高壓滅菌15min

⑦西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂(檸檬酸鹽) NaCL 5克 硫酸鎂 0.2克 磷酸銨(NH4H2PO4)1克 磷酸氫二鉀K2HPO4)1克 枸櫞酸鈉 5克 瓊脂 20克 蒸餾水 1000mL 0.2%溴麝香草酚蘭酒精溶液 40mL pH 6.8 121℃高壓滅菌15min

⑧童漢氏蛋白胨水 蛋白胨 10克 NaCL 5克 蒸餾水 1000mL pH 7.4 121℃高壓滅菌15min?、嵯跛猁}肉湯 牛肉膏 3克 蛋白胨 5克 硝酸鉀 1克 蒸餾水 1000mL pH 7.0 121℃高壓滅菌20min(15min)